Neisseria gonorrhoeae e Chlamydia trachomatis são consideradas juntas as doenças mais freqüentemente relatadas nos Estados Unidos, com uma estimativa de mais de cinco milhões de novas infecções anualmente. O Centro de Controle da Doença (CDC) relatou mais de 300.000 casos da infecção por gonorréia e mais de 390.000 casos de infecção por Clamidia em 1996^1,2. Ambos patógenos são de particular interesse e preocupação porque, na maioria dos países desenvolvidos, propagam-se rapidamente entre jovens e, a maioria dos indivíduos sexualmente ativos permanece assintomático tempo suficiente para transmitir a infecção para outros. Enquanto a maior parte das infecções nos homens evolui rapidamente por produzir sintomas aparentes, fazendo com que busquem tratamento, a incidência de infecções assintomáticas nas mulheres é bem maior e as bactérias não detectadas desenvolvem sérias complicações como a Doença Inflamatória Pélvica (DIP) e a infertilidade³. O número anual de pacientes que visitam as clínicas com sintomatologia por PID nos Estados Unidos ultrapassa os 2,5 milhões. Mais de 250.000 mulheres são hospitalizadas todo ano com mais de 100.000 procedimentos cirúrgicos realizados devido ao PID⁴. Os custos diretos e indiretos dos doentes com Clamidia excedem os 2,4 bilhões de dólares por ano de acordo com vários estudos^5,6. Em resposta a isso, o CDC tem preconizado, durante exames ginecológicos, o rastreamento de rotina para os indivíduos sexualmente ativos e jovens adolescentes assintomáticas. Sugere-se que mulheres com idade entre 20 a 24 sejam também rastreadas, principalmente aquelas que não utilizam contraceptivos de barreira ou possui novos ou múltiplos parceiros⁷.

Infecção por Clamidia

A CT é um organismo gram negativo, com duas fases em seu ciclo, uma elementar e outra reticular, com formas distintas de infecção e reprodução¹³. O genoma da CT é relativamente pequeno, com aproximadamente 1x10⁶ pares de bases¹⁴. A infecção forma um corpo elementar que não pode se dividir e serve apenas para levar a infecção de uma célula para a outra. Uma vez dentro da célula hospedeira, os corpos elementares se agrupam formando vacúolos para gerar formas reprodutíveis de CT metabolicamente ativa. São os chamados corpos reticulares. A replicação é inteiramente dependente do ATP e acompanhada diretamente a divisão binária dentro das inclusões citoplasmáticas, produzindo nova geração de corpos elementares que são liberados para infectar outras células. A CT diferencia-se pela membrana de lipopolissacarídeo gene-específico que serve como origem de antígenos para produção de anticorpos específicos.

Os métodos convencionais para a detecção direta da CT em espécimes clínicos incluem a coloração por Giemsa ou iodina seguida de avaliação microscópica¹⁵ ou, uma técnica mais sensível de Ac conjugados a fluoresceína (DFA)¹⁶. No entanto, estes métodos possuem de 70 a 85% de sensibilidade quando comparados com a técnica de cultura celular¹⁷. O procedimento mais aceitável para a detecção de Clamidia é a infecção de células em MacCoy em cultura. Anticorpos conjugados a fluoresceína são então usados para detectar corpos de inclusões intracitoplasmáticas formados por um elemento reprodutivo nas células infectadas¹⁸. A cultura de células tem uma excelente sensibilidade e especificidade, mas é método complexo, caro e o resultado muito demorado. Os resultados geralmente só estão disponíveis entre 48 a 72 horas após a inoculação¹⁹. As técnicas enzimáticas são também usadas para detectar antígenos¹⁷ de CT e são pouco mais sensível e menos específico que as técnicas de anticorpos fluorescentes direto²⁰. Os testes de ácidos nucléicos são também disponíveis para a detecção de variabilidade de cepas de Clamidia, incluindo o DNA cromossomal, mRNA e o plasmídeo críptico. Estes métodos variam em sensibilidade e especificidade, mas em geral aproximam-se ou excedem a performance dos métodos de cultura celular^21,22,23.

Infecção por Gonococos

Neisseria gonorrhoeae são diplococos Gram negativos, não móveis, que necessitam de meios complexos para o seu crescimento. São bactérias aeróbicas possuindo ótimo crescimento em temperaturas que variam de 35 a 37ºC, preferencialmente na presença de umidade e CO₂. Diagnósticos presuntivos da Neisseria gonorrhoeae são obtidos tradicionalmente por isolamento do organismo em cultura de espécimes ou utilizando a coloração de Gram para exame morfológico. O diagnóstico definitivo pode ser obtido com a positividade da oxidase e/ou catalase na cultura. Confirmações adicionais dos resultados incluem testes de degradação do carboidrato, aglutinação e fermentação do açúcar. Para os homens com uretrite sintomática, este teste possui sensibilidade e especificidade de aproximadamente 95 a 99%, no entanto, a coloração de Gram para os esfregaços endocervicais é bem menos sensível⁸. Testes diretos para Neisseria gonorrhoeae incluem a detecção de antígeno e os testes dos ácidos nucléicos. O teste enzyme linked immunoabsorbent tem se mostrado mais específico e sensível que a coloração por Gram para a detecção gonocócica na uretra masculina, mas possui sensibilidade diminuída quando aplicada para os espécimes endocervicais^9,10. Isto porque nos testes para a detecção dos antígenos pode ocorrer reação cruzada com Neisseria comensal e outras espécies¹¹. Por isso, este teste só deve ser usado para o diagnóstico presuntivo¹².

Recentemente, a detecção direta do ácido nucléico da Neisseria gonorrhoeae tem sido usada para avaliar amostras clínicas. Este teste, realizado tanto em espécimes uretrais como endocervicais, é considerado como o mais específico e sensível para a detecção da Neisseria gonorrhoeae em populações de alto risco.

Referências Bibliográficas.