Os
espécimes colhidos no UCM® são
estáveis à temperatura ambiente por até
15 dias, e se mantido na geladeira (entre 2 a 8ºC)
sua viabilidade se eleva para até seis meses.
É
importante salientar que o Sistema DNA-CITOLIQ® é
desenhado para que se possa confeccionar de 1 (uma) até
12 (doze) lâminas citológicas por vez. Portanto
permite o uso parcial do Duogene®.
Preparação dos materiais
1. Limpar a área de trabalho com álcool
a 70%;
2. Se estiverem sob refrigeração, retirar
os espécimes da geladeira e deixar à temperatura
ambiente por 30 minutos;
3. Colocar os espécimes no UCM® Rack, na mesma
ordem em que as lâminas serão preparadas;
4. Abrir o Prepgene® a 180º e deixar sobre uma
superfície plana;
5. Abrir a embalagem do Duogene® ;
6. Com o Lamigene® sobre a bancada, identificar as
lâminas com o registro e / ou nome das pacientes;
7. Adaptar o Lamigene® e o Filtrogene®
em seus devidos encaixes.
Procedimento
de Preparação das Lâminas
1. Homogeneizar os tubos individualmente no vortex em
alta velocidade por 15 segundos. Essa etapa visa desprender
as células contidas nas cerdas, para tanto: a)
Segurar firmemente o tubo da amostra. O tubo deverá
ser seguro pela tampa e não no meio; veja
aqui b) Se persistirem "grumos", evitá-los
na pipetagem; c) Ao agitar no vortex, observar se o material
está se movimentando no tubo; caso não esteja,
readequar a posição da mão junto
ao tubo e recomeçar o processo.
2. Antes de pipetar cada amostra, homogeneizar no vortex
por mais 5 segundos;
3. Remover a tampa do tubo e pipetar 200 µl da amostra;
4. Dispensar sobre a membrana de policarbonato, espalhando
esta alíquota uniformemente sobre toda a superfície
da membrana veja
aqui;
5. Fechar a tampa do Prepgene® veja
aqui, travar nas laterais e esperar 10 segundos veja
aqui. Nesta fase, realiza-se o imprint, transferindo
assim para a lâmina, todo o material não
filtrado pela membrana;
6. Com cuidado, destravar e levantar a tampa do Prepgene®
para trás;
7. Retirar o Lamigene®;
8. Fixar as lâminas contendo o imprint celular com
fixador em spray ou mergulhar totalmente o Lamigene®
em cuba apropriada com álcool absoluto;
9. Retirar as lâminas do Lamigene® e proceder
à técnica habitualmente empregada de coloração;
10. Desprezar o Lamigene® e o Filtrogene® no lixo
para resíduos biológicos.
Advertências
1. A fim de não alterar suas características
físicas, deve-se tomar o cuidado para não
se tocar a membrana com a ponta da ponteira.
2. As pipetagens devem ser rápidas, contínuas
e precisas, pois o tempo prolongado de pipetagem poderá
acarretar ressecamento do material sobre as primeiras
membranas.
3. Quando utilizar Carbovax como fixador, aguardar no
mínimo 20 minutos antes de realizar a coloração
das lâminas.
Avisos
e Precauções
1. É POSSÍVEL CONTAMINAR-SE COM AGENTES
INFECCIOSOS AO MANIPULAR ESPÉCIMES.
2. Não pipetar com a boca.
3. Não comer, beber ou fumar em áreas onde
são manipulados reagentes ou espécimes.
4. Usar luvas descartáveis isenta de pó,
enquanto estiver manipulando espécimes. Lavar as
mãos após a preparação das
lâminas.
5. Todo o material produzido deve ser tratado antes de
ser descartado em local próprio para materiais
potencialmente contaminados.
6. Azida sódica é usado como conservante
em alguns reagentes. Podem reagir com os encanamentos
de chumbo e cobre do laboratório formando azidas
metálicas altamente explosivas. Para prevenir a
formação destas azidas, ao descartar os
reagentes, utilizar grandes volumes de água para
enxaguar os encanamentos.